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解毒利咽法治疗IgA肾病模型大鼠作用机制

基于TH1/TH2失衡探讨补肾健脾,解毒利咽法治疗IgA肾病模型大鼠作用机制

观察补肾健脾,解毒利咽法对IgA肾病模型大鼠TH1/TH2的影响,探讨该法治疗IgA肾病的作用机制,为临床治疗IgA肾病提供实验学依据。方法:选择雄性健康清洁级Wistar大鼠80只,体重180±20g,购买回来后适应性饲养1周,采用分层随机的分组方法将大鼠分为空白组10只,造模组70只。空白组给予灌胃生理盐水、皮下注射生理盐水、尾静脉注射生理盐水,造模组采用灌胃牛血清白蛋白(Bevine serum albumin,BSA)、皮下注射四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCL4)、尾静脉注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),制备IgA肾病模型大鼠。IgA肾病模型制备成功后,将造模组分为模型组、洛汀新对照组、补肾健脾,解毒利咽中药高、中、低剂量组。给予对照组洛汀新片组予6mg/(kg.d)灌胃;予补肾健脾,解毒利咽中药低剂量组4ml/(kg·d)灌胃,(相当于中药饮片量8g/kg)、中剂量组4ml/(kg·d)灌胃,(相当于中药饮片量16g/kg)、高剂量组中药汤剂4ml/(kg·d)灌胃,(相当于中药饮片量32g/kg灌胃);空白组、模型组每天给予生理盐水灌胃,4ml/只。共给药8周。观察指标:(1)大鼠的一般状态;(2)检测实验各组大鼠24小时尿红细胞计数及24小时尿蛋白尿定量;(3)检测大鼠血清肾功能、肝功能;(4)测定肾脏组织中TH1/TH2的含量;(5)观察TH1/TH2在肾组织中的定位表达;(6)检测IgA复合物在肾脏组织中的沉积。结果:(1)在实验过程中大鼠共计死亡24只,其中验证模型处死12只大鼠,造模过程中死亡10只,治疗过程中死亡2只(治疗过程洛汀新对照组死亡2只)。(2)空白组大鼠在整个实验过程中一般状态较好,无明显异常。各模型组大鼠在给予四氯化碳皮下注射后表现为精神萎靡,毛发杂乱不光泽,口鼻血性分泌物,腹泻,体重下降等表现。经过治疗2周后各治疗组大鼠状态好转,腹泻症状减少,体重增加。(3)空白组大鼠无血尿及蛋白尿症状出现,造模组大鼠24小时尿红细胞计数和24小时尿蛋白定量明显升高,各治疗组经过补肾健脾,解毒利咽法治疗后大鼠尿红细胞和蛋白尿有所下降(p<0.05),中药组优于洛汀新组(p<0.05)(4)IgA肾病模型大鼠肾脏组织中IFN-γ的水平与空白组比较明显下降,IL-4的水平明显升高。(5)各治疗组大鼠经治疗后IFN-γ水平明显上调(p<0.05),IL-4的水平明显下调(p<0.05),且中药组疗效优于洛汀新组(p<0.05)。(6)实验各组大鼠肾功能、肝功能比较无统计学差异(p>0.05)。结论:(1)IgA肾病模型大鼠肾组织中TH1/TH2平衡发生偏移,向TH2偏移。(2)在经过给药治疗后TH1的水平明显回升,说明TH1与病情呈正相关;经给药治疗后TH2的水平有所下调,说明TH2与病情呈负相关;说明TH1/TH2的异常表达参与了IgA肾病的发病,从而导致IgA肾病的发生。(3)通过各治疗组比较,补肾健脾,解毒利咽方药可能的机制是通过调节IgAN模型大鼠肾组织中THI/TH2平衡,来延缓IgAN的发生发展。

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