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在使用细胞培养基是应该注意些什么事项

  细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。
 
  基础培养基:绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学通用的培养基Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非zui佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。
 
  细胞培养基使用注意事项:
 
  1、待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠,以免产生沉淀。
 
  2、细胞培养用水一般为三蒸水或超纯水,医药生产上一般为注射用水。
 
  3、如需添加的组分较多时,某一组分完全溶解后,再添加另一组分。
 
  4、溶解干粉培养基时先加入终体积90%-95%的培养用水,添加剂加完后再补足。
 
  5、所有成分完全溶解后,培养基应立即过滤或高压除菌,以免产生沉淀或有微生物污染。
 
  6、建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用,因为包装一旦打开,组分可能会变质或因受潮而结团。
 
  7、在过滤除菌时,一般情况下应调pH比所需值低0.1~0.2个单位,因过滤除菌后,pH值会升高约0.2。
 
  8、在细胞培养基过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。
 
  9、建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠来调对培养液的渗透压影响比较大。

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