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试剂盒常见的操作方法有以下两种

  试剂盒采用三轮质检方式,zui大限度地保证了试剂盒小的批内差、批间差。试剂盒组分经过重重优化,每个组分的稳定性都的经过高温破坏测验,zui大程度的避免了长途运输和保存过程中抗原抗体的失活,武汉华美试剂盒凭借其的标曲、严格的质控、较高的稳定性,在世界范围内的科研试剂领域中脱颖而出,深受数十个国家上万名使用者的青睐。
 
  试剂盒的操作方法:
  双抗体夹心法:
  1、包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
  2、加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。
  3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
  4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
  5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
 
  间接法:
  1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。
  2、次日洗涤3次。
  3、加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。
  4、于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml。
  5、37℃孵育35-60分钟,洗涤。
  6、后一遍用DDW洗涤。

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