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关于酶联免疫检测试剂盒实验中的相关操作技巧

   酶联免疫检测试剂盒的基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的ELISA(酶联免疫吸附试验)法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
 
  关于酶联免疫检测试剂盒实验中的相关操作技巧:
 
  洗板方法:
  1、手艺洗板方法:吸去(不行触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,依据需要,重复此进程数次。
  2、主动洗板:如果有主动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式实验进程中。
 
  计算:
  以规范物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出规范曲线,依据样品的OD值由规范曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用规范物的浓度与OD值计算出规范曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
 
  注意事项:
  1、在制造规范品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液制造,不能混杂。
  2、请每次测定的同时做规范曲线,做复孔。
  3、底物请避光保存。
  4、洗涤进程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
  5、如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
  6、酶联免疫检测试剂盒实验时,一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐运用排枪加样。

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