13052188602
新闻资讯
首页 > 新闻资讯 > 对TNF-α试剂盒正确的操作步骤进行详细说明

对TNF-α试剂盒正确的操作步骤进行详细说明

  TNF-α试剂盒标曲清晰,市场反响很好,灵敏度高,测定标本十分广泛。我司具有稳定的实验体系,的科研队伍,准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴,凡购买我司的试剂盒产品都可提供全程免费技术指导。
 
  TNF-α试剂盒实验目的要求了解试验原理,试验方法及结果分析。我司产品涉及行业广泛,有免疫学,分子学,蛋白质表达纯化及检测,细胞学相关实验等。可随时提供产品zui新价格查询、供应系列产品、批发等业务。
 
  TNF-α试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。用特异性的大鼠TNF-α单克隆抗体包被在96孔板上,制作固相抗体。加入标准品和检测样品,随后加入大鼠TNF-a特异性的山羊来源,生物素标记的多克隆检测抗体。经过孵育,加入抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物,利用HRP催化底物TMB转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠肿瘤坏死因子α呈正相关。
 
  TNF-α试剂盒操作步骤:
 
  1、标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
 
  2、加样:分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
 
  3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
 
  4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
 
  5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
 
  6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
 
  7、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
 
  8、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
 
  9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
 
  10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应。
 
  11、TNF-α试剂盒的测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

文章资讯

  • 新闻资讯
  • 技术文章
    • 联系我们

      邮箱:shlmai@163.com
    • 地址:上海市松江区新车公路185号上海莘莘学子创业园
    • 座机:86-021-67680335
    • 联系人:周经理

    Copyright © 2018 All Rights Reserved 网站地图 技术支持:环保在线  备案号:  管理登陆

    分享到:
    在线客服