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iCell-0013兔肝间质永生化(STR鉴定)

简要描述:

iCell-0013兔肝间质永生化(STR鉴定)

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iCell-0013兔肝间质永生化(STR鉴定)
英文名称:
规格:1*10 6  
细胞介绍
一、细胞特性
二、细胞收到后处理
iCell-0013兔肝间质永生化(STR鉴定)
在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
三、细胞培养步骤
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约6ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心5分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;

  1. 冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
  2. 存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
  3. 冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
  4. 视具体情况而定。

 ★ 注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发 收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发。

相关细胞系列表:

人慢性髓系白血病细胞株K562 人源 1×10^6 细胞数/ml FaDu细胞

人慢性髓系白血病阿霉素耐药株K562A 人源 1×10^6 细胞数/ml Farage细胞

人胃癌细胞SNU-216 人源 1×10^6 细胞数/ml FHs74Int细胞

小鼠小胶质细胞BV-2 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml G-401细胞

人皮肤鳞癌细胞A431 人源 1×10^6 细胞数/ml GBC-SD细胞

大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12(分化) 大鼠源 1×10^6 细胞数/ml GOS-3细胞

舌癌cal-27 人源 1×10^6 细胞数/ml GS-HepG2细胞

胃腺癌细胞株SGC7901 人源 1×10^6 细胞数/ml H4细胞

胃腺癌细胞株BGC823 人源 1×10^6 细胞数/ml H9细胞

乳腺癌细胞SK-BR-3 人源 1×10^6 细胞数/ml HaCaT细胞

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml HAL-01细胞

人非小细胞肺癌细胞NCI-H1299 人源 1×10^6 细胞数/ml HCC1937细胞

小鼠成肌细胞 C2C12 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml HCC38细胞

人乳腺癌细胞 MCF7 人源 1×10^6 细胞数/ml HCC4006细胞

3T3-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml HCC827细胞

BHK-21叙利亚仓鼠肾细胞 小鼠源 1×10^6 细胞数/ml HCC94细胞

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