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胚胎肝间质细胞永生化

简要描述:

胚胎肝间质细胞永生化是来源于早期中胚层的一类多能干细胞, 在体内具有分布广泛, 体外能够大量扩增和免疫原性低等特点, 是一种细胞治疗的理想种子细胞。自20世纪60年代,Friedenstein等发现在人骨髓长期培养中, 存在一种形态类似成纤维细胞的贴壁生长的细胞且移植到小鼠体内具有成骨能力和造血支持作用,

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胚胎肝间质细胞永生化

产品规格:>5×105细胞数
产品价格:3750
包装规格:1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶
英文名称: Duck Embryo Liver Interstitial Cells
胚胎肝间质细胞永生化详述
间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是来源于早期中胚层的一类多能干细胞, 在体内具有分布广泛, 体外能够大量扩增和免疫原性低等特点, 是一种细胞治疗的理想种子细胞。自20世纪60年代,Friedenstein等发现在人骨髓长期培养中, 存在一种形态类似成纤维细胞的贴壁生长的细胞且移植到小鼠体内具有成骨能力和造血支持作用, 将这种细胞命名为骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells, BMSCs)。到20世纪90年代末, 人们才成功分离一种具有成骨、成软骨和成脂肪能力的细胞, 称之为间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)。
随后研究者也从其他组织, 如脂肪、脐带、胎盘、肝脏、骨实质和肌肉等中成功分离获得间充质干细胞。作为一类成体干细胞中的间充质干细胞, 目前大部分的研究集中在人及大鼠、小鼠这两种模式动物上, 其他动物的间充质干细胞报道相对较少。选取中国特有家禽品种鸭子为实验材料, 以鸭胚胎肝脏中的间充质干细胞为研究对象, 对其进行分离培养鉴定, 进行增殖能力检测及分化能力鉴定, 为家禽干细胞研究及畜禽遗传资源保存提供借鉴及参考。鸭胚胎肝间质细胞进行慢病毒转染8-12h,连续传13代,采用高浓度含嘌呤霉素培养基(4μg/mL)培养,筛选阳性克隆;筛选出阳性永生化鸭胚胎肝间质细胞。
特性:
1)  来源:上海中科院动物研究所
2)  含量:>5x105个/mL
3)  污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4)  规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
推荐培养基:
我们推荐使用原代间质细胞培养体系作为体外培养原代肝间质细胞永生化的培养基。
产品使用:
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核
原代细胞分离
一、细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏(可参阅后面有关章节)为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
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