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非冻型组织RNA保存液

简要描述:

非冻型组织RNA保存液是一种在较高温度下保存RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。其主要特点是:
1. 非冻保存提取RNA用的新鲜组织,在37℃下可保存1天,25℃下可保存1周,4℃下可保存1月,在-20℃或-80℃下可长期保存。其间样品可反复冻融十多次。

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非冻型组织RNA保存液

名称

规格

价格

手册

非冻型组织RNA保存液

250 mL

790元

 

RNALOCKER是一种在较高温度下保存RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。其主要特点是:

1. 非冻保存提取RNA用的新鲜组织,在37℃下可保存1天,25℃下可保存1周,4℃下可保存1月,在-20℃或-80℃下可长期保存。其间样品可反复冻融十多次。

2. 用范围广,可用于保存、邮寄和运输病毒、细菌、果蝇、植物组织、动物组织、培养细胞、悬浮细胞(白细胞、流式细胞仪收集的细胞)等。

3. 兼容性广,RNALOCKER保存的样品可以直接用于RNA提取,也可直接用于组织切片、免疫学和流式细胞分析。

4. 结果准确,本产品进入细胞后能迅速锁定RNA水平,使实验结果更能准确反映取样时基因表达谱的真实状态。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。

实验步骤:

1、RNA的提取;

2、反转录合成cDNA;

3、PCR扩增;

4、产物的电泳和结果的测定。

RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。

碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。

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