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水样病毒沉淀剂

简要描述:

水样病毒沉淀剂环境水样是各种病毒(包括动物病毒,植物病毒等)存在的场所,了解水样病毒的污染情况对环境检测和公共卫生具有重要的意义。但除生活污水外的环境水样中,游离病毒的浓度往往很低,不能用目前较灵敏的PCR基因检测方法检测,因此常常需要在检测前对水样进行浓缩处理,能否有效浓缩已经成为能否成功检测到水样病毒的关键。目前还没有一种理想的跟PCR或RT-PCR兼容的病毒浓缩方法,为此,本公司根据絮凝原理

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水样病毒沉淀剂

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水样病毒沉淀剂

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790元

 

环境水样是各种病毒(包括动物病毒,植物病毒等)存在的场所,了解水样病毒的污染情况对环境检测和公共卫生具有重要的意义。但除生活污水外的环境水样中,游离病毒的浓度往往很低,不能用目前zui灵敏的PCR基因检测方法检测,因此常常需要在检测前对水样进行浓缩处理,能否有效浓缩已经成为能否成功检测到水样病毒的关键。目前还没有一种理想的跟PCR或RT-PCR兼容的病毒浓缩方法,为此,本公司根据絮凝原理开发了本产品。它具有下列特点:
1. 病毒回收率达到90%以上,高于绝大部分基于过滤的浓缩方法。适用于各种病毒。
2. 操作简单,除低速离心机外,不需要其他贵重的仪器设备。不会出现过滤法常见的膜堵塞现象。
3. 能有效去除PCR抑制物,和后续的PCR检测(包括RT-PCR)兼容。
4. 试剂无毒环保,不需要使用有机溶液。
5. 可放量操作,本试剂盒zui多可以处理10L水样(更大规格可定做)。
6.   可用于具有各种水质特性的水样,包括河水,自来水,生活污水,海水等。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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