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植物RNA提取专用高盐溶液

简要描述:

植物RNA提取专用高盐溶液植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,会阻碍和影响后续实验。本产品主要用于 去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已经提取的植物RNA溶液中或在使用植物 RNAout(产品编号:3080)提取植物RNA过程中加入本产品,再经过异丙醇沉淀, 可以达到去除多糖、多酚的目的,得到高纯度的RNA。本产品具有下列特点:
1. 本产品不含DNase和RNase。

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植物RNA提取专用高盐溶液

名称

规格

价格

手册

植物RNA提取专用高盐溶液

100ML

390元

 

植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,会阻碍和影响后续实验。本产品主要用于 去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已经提取的植物RNA溶液中或在使用植物 RNAout(产品编号:3080)提取植物RNA过程中加入本产品,再经过异丙醇沉淀, 可以达到去除多糖、多酚的目的,得到高纯度的RNA。本产品具有下列特点:
1. 本产品不含DNase和RNase。
2. 经本产品处理后的RNA纯度高,可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、体外 翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实 验。
3. 本产品不能用于小分子量RNA中多糖、多酚的去除,会严重影响小分子量RNA的 回收率。
4. 在处理微量RNA样品时,在去除多糖、多酚的同时,RNA损耗也较大,此时可以 添加产品微量核酸沉淀剂(CAT:50903)以提高回收率。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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