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RNase抑制剂(人源)

简要描述:

RNase抑制剂(人源)本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor,其分子量为50 KD,能通过与RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
1. 抑制范围广,可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性,但不能抑制RNase T1

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RNase抑制剂(人源)

名称

规格

价格

手册

RNase抑制剂(人源)

2500 U

490元

 

本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor,其分子量为50 KD,能通过与RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。
1. 抑制范围广,可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性,但不能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2. 与SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV逆转录酶、Taq DNA聚合酶等兼容。
3. 在广泛的pH范围(pH 5-8)有活性。
4. 应用范围广,可以用于RT-PCR、cDNA合成、in vitro transcription or translation等需要抑制RNase活性的酶反应中。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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