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RNase抑制剂(小鼠源)

简要描述:

RNase抑制剂(小鼠源)本RNase 抑制剂是鼠源重组蛋白,分子量为 50 kDa,可以特异性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它与 RNase 以 1:1 的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,该抑制剂不会抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV

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RNase抑制剂(小鼠源)

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RNase抑制剂(小鼠源)

3000U

990元

 

本RNase 抑制剂是鼠源重组蛋白,分子量为 50 kDa,可以特异性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它与 RNase 以 1:1 的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNaseH 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,该抑制剂不会抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶 (SP6、T7 或 T3) 。
重组小鼠 RNase 抑制剂不含有半胱氨酸,已证实,人源中的半胱氨酸能导致抑制剂对氧化敏感甚至失活。因此,小鼠 RNase 抑制剂与人/猪 RNase 抑制剂相比,抗氧化能力显著提高,且在 DTT 浓度较低 (< 1 mM)  时更稳定。这使其在不适宜高浓度 DTT的反应中更具优势,如实时 RT-PCR。
本产品具有下列特点:
1.  抑制常见真核 RNase
2.  与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容
3.  在较宽的 pH 范围内均有活性 (pH 5-8)
4.  cDNA 合成和 RT-PCR
5.   体外转录/翻译
6.   酶催化的 RNA 标记反应
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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