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大提柱式血液DNAout

简要描述:

大提柱式血液DNAou本产品是基于离心柱/硅胶膜DNA吸附原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的大提试剂,它是柱式血液DNAout(CAT#:60306-50)的大提升级版,具有下列特点:
1. 处理量更大,一次可以处理5-50 mL血液(对哺乳动物血液)。t

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大提柱式血液DNAout

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本产品是基于离心柱/硅胶膜DNA吸附原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的大提试剂,它是柱式血液DNAout(CAT#:60306-50)的大提升级版,具有下列特点:
1. 处理量更大,一次可以处理5-50 mL血液(对哺乳动物血液)。
2. 吸附量大,一个离心吸附柱最多可以吸附800 μg的DNA。
3. DNA纯净,OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、Southern杂交等实验。
4. 产量高,一般为200-600 μg/10 mL全血(对哺乳动物血液而言)。
5. 操作简单,整个过程约20分钟,全室温操作,适合大规模样品处理。
6. 安全无毒,本试剂盒不使用苯酚和,对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
7. 本产品也可用于禽类血液等非哺乳动物血液,但各成分用量需要适当优化。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
相关产品列表:
RNase-Free TE Buffer(无RNase的TE缓冲液),pH8.0   
RNase-Free Tris-HCl Solution(无RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH7.4  
RNase-Free Tris-HCl Solution(无RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH8.0  
Saponine Permeating Solution in PBS(皂素PBS渗透液),5X 
Saponine Permeating Solution in TBS,5X  
SDS Solution(SDS溶液),10% 
SDS Solution(SDS溶液),20%,pH7.2
Semi Dry Blot Transfer Buffer 
Separating or Resolving Buffer(分离胶缓冲液)

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