磁珠植物DNAout

磁珠植物DNAout

本试剂盒是利用磁珠的方法提取各种基因组DNA的产品 ，样品经裂解液处理后，
DNA吸附在磁珠的表面。在外加磁场的作用下，使DNA与其他他组分分离。它具有下列特点：
1. 快速简捷，提取过程无需离心，一般可在36分钟内完成。
2. 所得DNA纯度高，OD260/OD280一般达1.7-1.9，可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。
3.   操作过程中不接触，酚等有毒物质。
4.   得率高，100mg植物组织一般可以得到2~20µg基因组DNA。
5.   性价比高，质量与进口试剂盒相当，但价格更便宜。
6.  除适用于手工操作外，亦可配合国内外各类磁棒式核酸提取仪或核酸提取工作站使用。
7.   适用范围广，可用于绝大多数植物的各种组织，包括富含多糖、多酚的组织。
RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤：
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
相关产品列表：
MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5 
MOPS-SDS Running Buffer,20X
Neutralization Solution 
Nickel Chloride Solution（氯化镍溶液）,0.5M 
Nickel Sulfate Solution（硫酸镍溶液）,0.5M 
Nitrocellulose Stripping Buffer,10X（硝酸纤维素膜剥离缓冲液，10X）
Normal Tyrode’s Bicarbonate Buffered Solution 
NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X（含甘油型NP40裂解液，2X）
NP40 Lysis Buffer（NP40裂解液）
NP40 Lysis Buffer,2X（NP40裂解液，2X）