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柱式内毒素清除剂

简要描述:

柱式内毒素清除剂去除生物样品中的内毒素污染具有重要的临床意义,因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均有显著的毒性作用。由于内毒素化学本质是脂多糖(革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分),带电性与DNA相似,所以从大肠杆菌细胞中提取的质粒、蛋白质等物质常常含有大量内毒素污染,并且很难用常规方法去除。本试剂盒使用修饰过的多粘菌素B(Polymyxin B,PMB)进行特异性的内毒素去除。它具有下列特

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柱式内毒素清除剂

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柱式内毒素清除剂

1.5mL

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去除生物样品中的内毒素污染具有重要的临床意义,因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均有显著的毒性作用。由于内毒素化学本质是脂多糖(革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分),带电性与DNA相似,所以从大肠杆菌细胞中提取的质粒、蛋白质等物质常常含有大量内毒素污染,并且很难用常规方法去除。本试剂盒使用修饰过的多粘菌素B(Polymyxin B,PMB)进行特异性的内毒素去除。它具有下列特点:
1. 稳定性高,去除效率高。经本产品纯化,样品的内毒素水平可低于 0.1EU/ml 。 
2. 载量大,可以一次性去除;结合能力强,可以>2 000 000EU/mL的内毒素 。
3.   无需特殊恒流设备即可调节流速。
4.   重复使用5次不会改变柱子效果。
5.   一站式,随试剂盒提供无内毒素缓冲液,无内毒素收集管,无内毒素枪头等。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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