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超快核酸电泳液干粉

简要描述:

超快核酸电泳液干粉 本产品是联迈基因在超快DNA电泳液SuperBuffer的基础上开发出的又一新产品。它既可用于DNA的快速电泳(取代传统的TBE和TAE 电泳缓冲液),又能用于RNA的快速电泳(取代MOPS/甲醛电泳液)。它不但能大大缩短DNA和RNA电泳的时间,还使DNA胶回收率比TAE和TBE胶高2-3倍。使用本产品,实验室准备工作更加简单,再也不需要准备多种缓冲液。
1. 快速,用以较高

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超快核酸电泳液干粉 

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超快核酸电泳液干粉 

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本产品是联迈基因在超快DNA电泳液SuperBuffer的基础上开发出的又一新产品。它既可用于DNA的快速电泳(取代传统的TBE和TAE 电泳缓冲液),又能用于RNA的快速电泳(取代MOPS/甲醛电泳液)。它不但能大大缩短DNA和RNA电泳的时间,还使DNA胶回收率比TAE和TBE胶高2-3倍。使用本产品,实验室准备工作更加简单,再也不需要准备多种缓冲液。
1. 快速,用以较高电压电泳DNA和RNA电泳时,比常规电泳缓冲液高2-5倍(当然,也可以使用跟常规TBE、TAE和MOPS一样的电压进行电泳)。一般DNA电泳检测(如PCR检测)只需要5-10分钟即可。
2. 琼脂糖用量少(一般电泳用0.6-0.8%琼脂糖即可),节约成本。
3. DNA胶回收率是TAE和TEB胶回收率的2-3倍,总回收率为80-90%(对1 kb左右的DNA片段)。
4. 方便,加水即用。既适用于DNA,又适用于RNA,在同一块凝胶上可以同时电泳DNA和RNA两种不同的核酸,再也不需要预配多种缓冲液。
5. 对盐离子的耐受能力比SuperBuffer更强,含盐反应液(如PCR,酶切DNA产物等)也能直接电泳并得到很好的分辨率,不需要脱盐处理。
6. 由于组成成分不含氨基,故可以使用DEPC处理以去除RNase(Tris 和MOPS由于含氨基,故不能用DEPC直接进行RNase灭活处理)。
7. 价格跟市场上的TAE、TBE和MOPS预配液相当。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相, 离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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