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电泳级耐热型SYBR染料

简要描述:

电泳级耐热型SYBR染料本产品是改良型的SYBR Green I,它跟常规的SYBR Green I相比检测灵敏度相当,但具有耐热、耐水解的特点,所以十分稳定,使用更加方便。
1. 稳定,本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上,方便运输和保存。本产品的1X工作液在常温下的半衰期为120多天,比常规的SYBR Green I(5天)长20倍以上。

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电泳级耐热型SYBR染料

名称

规格

价格

手册

电泳级耐热型SYBR染料

50uL

297元

 

本产品是改良型的SYBR Green I,它跟常规的SYBR Green I相比检测灵敏度相当,但具有耐热、耐水解的特点,所以十分稳定,使用更加方便。
1. 稳定,本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上,方便运输和保存。本产品的1X工作液在常温下的半衰期为120多天,比常规的SYBR Green I(5天)长20倍以上。
2. 使用方便多样,既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中,还可以象常规的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar一样用于电泳后染色。
3. 灵敏,其检测灵敏度跟SYBR Green I相同,比EB灵敏200-100倍。
4. 低毒、环保、健康。
5. 可检测各种核酸分子,包括dsDNA、ssDNA、RNA和Oligo。
6. 兼容性好,不但与常用的TAE、TBE和SuperBuffer-2等电泳缓冲液兼容,还与常用的UV检测系统和可见光激发检测系统兼容。 
7. 对DNA泳动速度的影响小于常规的SYBR Green I。
8. 半衰期长,自然损耗低,可多次使用,使其相对使用成本比常规的SYBR Green I和其它非对称花青类染料低。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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