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一管式DNA胶回收试剂盒

简要描述:

一管式DNA胶回收试剂盒本产品是联迈基因*开发的革命性的DNA胶回收试剂,其最大特点是可以直接从溶化的琼脂糖凝胶中沉淀回收DNA,不使用离心吸附柱,没有样品转移过程,所以它能将对DNA的机械拉力降低到最低,尤其适合于回收长达5-50kb的大片段DNA(常规的离心吸附柱不能有效回收5Kb以上DNA)。
1. 一管式操作,不需要离心吸附柱,过程中不需要转移样品,对DNA的机械破坏小。
2. 适合于回

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一管式DNA胶回收试剂盒

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一管式DNA胶回收试剂盒

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本产品是联迈基因*开发的革命性的DNA胶回收试剂,其最大特点是可以直接从溶化的琼脂糖凝胶中沉淀回收DNA,不使用离心吸附柱,没有样品转移过程,所以它能将对DNA的机械拉力降低到最低,尤其适合于回收长达5-50kb的大片段DNA(常规的离心吸附柱不能有效回收5Kb以上DNA)。
1. 一管式操作,不需要离心吸附柱,过程中不需要转移样品,对DNA的机械破坏小。
2. 适合于回收从100bp到50kb的各种大小的DNA片段,包括用常规离心吸附柱方法不能有效回收的5 kb以上的质粒,BAC、基因组DNA等片段。
3. 快速,整个过程不到15分钟(对一个样品而言),由溶胶(3分钟),放置(2分钟),沉淀(5分钟)和两次洗涤(各1-2分钟)几步组成。
4. 纯度高,回收产物可以直接用于连接、酶切、PCR、测序等各种反应,不影响后续酶反应。
5. 回收率高,一般在大于50%。
6. 既可用于回收单双链DNA,又可用于回收单双链RNA。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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