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PCR法DNA探针生物素标记试剂盒

简要描述:

PCR法DNA探针生物素标记试剂盒 PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,最后得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。本产品在上述原理的基础上本产品的特点是:

1. 一站式,不需要自己单独准备标记的核苷酸。

2. 可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记(80918A,但需自备标记底物,底物包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、r

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PCR法DNA探针生物素标记试剂盒 

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PCR法DNA探针生物素标记试剂盒 

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990元

 

PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,最后得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。本产品在上述原理的基础上本产品的特点是:

1. 一站式,不需要自己单独准备标记的核苷酸。

2. 可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记(80918A,但需自备标记底物,底物包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP)、其中80918B和80918C可直接用于生物素和地标记,不需自备标记底物。

3. 如果使用非同位素标记,得到的DNA探针将非常稳定,可以低温长期放置。

4. 可以用于Southern 和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相, 离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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