绿如蓝染料,PCR级第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,具有下列特点:1. 饱和浓度不抑制PCR反应,因此得到的荧光信号更强。
绿如蓝染料,PCR级
名称 | 规格 | 价格 | 手册 |
绿如蓝染料,PCR级 | 0.1mL | 197元 |
|
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,具有下列特点:
1. 饱和浓度不抑制PCR反应,因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会发生移位,荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm测定实验(如High-resolution melting curve analysis)。
4. 跟目前常用的PCR仪器兼容(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I接近,可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6. 使用简单,加入到PCR溶液中即可。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
相关产品列表:
小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA Kit
小鼠降钙素(CT)ELISA Kit
小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA Kit
小鼠降钙素原(PCT)ELISA Kit
小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA Kit
小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA Kit
小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA Kit
小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit
小鼠解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA Kit
小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA Kit
小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA Kit
相关产品