石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒

石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒

本产品是用于从石蜡包埋组织中制备和扩增全基因组的试剂盒。通常从福尔马林固定石蜡包埋组织中得到的DNA会发生快速降解，因为使用福尔马林固定会导致DNA链断裂，碱基损坏以及发生DNA-蛋白质交联（DPC），使以石蜡包埋组织为材料扩增基因组DNA产生极大的困难。本产品以通过修补反应，使发生损坏的DNA能够进行全基因组扩增，提高了实验效率，可以得到良好的实验结果，满足客户实验需要。本产品有如下优点：

1． 增加了一管式DNA修补处理步骤，使短片段DNA也能用于WGA。

2． 即开即用，不需要单独准备所需试剂。

3． 具有高保真，高产量的特点，可以扩增石蜡包埋组织的基因组达上万倍。

4． 适用于各种石蜡包埋组织样品。

5． WGA产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异、微卫星差异、SNP、STR）等。

6． 可与本公司石蜡包埋组织DNA提取试剂盒（CAT#：70502）配合使用得到更好的实验效果。

RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤：
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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