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石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒

简要描述:

石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒本产品是用于从石蜡包埋组织中制备和扩增全基因组的试剂盒。通常从福尔马林固定石蜡包埋组织中得到的DNA会发生快速降解,因为使用福尔马林固定会导致DNA链断裂,碱基损坏以及发生DNA-蛋白质交联(DPC),使以石蜡包埋组织为材料扩增基因组DNA产生极大的困难。本产品以通过修补反应,使发生损坏的DNA能够进行全基因组扩增,提高了实验效率,可以得到良好的实验结果,满足客户实验

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石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒

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石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒

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本产品是用于从石蜡包埋组织中制备和扩增全基因组的试剂盒。通常从福尔马林固定石蜡包埋组织中得到的DNA会发生快速降解,因为使用福尔马林固定会导致DNA链断裂,碱基损坏以及发生DNA-蛋白质交联(DPC),使以石蜡包埋组织为材料扩增基因组DNA产生极大的困难。本产品以通过修补反应,使发生损坏的DNA能够进行全基因组扩增,提高了实验效率,可以得到良好的实验结果,满足客户实验需要。本产品有如下优点:

1. 增加了一管式DNA修补处理步骤,使短片段DNA也能用于WGA。

2. 即开即用,不需要单独准备所需试剂。

3. 具有高保真,高产量的特点,可以扩增石蜡包埋组织的基因组达上万倍。

4. 适用于各种石蜡包埋组织样品。

5. WGA产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异、微卫星差异、SNP、STR)等。

6. 可与本公司石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(CAT#:70502)配合使用得到更好的实验效果。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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