13052188602
产品中心
首页 > 产品中心 > 分子生物学 > 克隆及表达产品 > 克必隆B载体(即用型平末端克隆载体)

克必隆B载体(即用型平末端克隆载体)

简要描述:

克必隆B载体(即用型平末端克隆载体)本产品是在LMAI Bio克必隆G载体的基础上开发的专门用于高效快速克隆平末端DNA段的专用载体,它是由SmaI酶切克必隆G载体后经过纯化得到的即用型线性载体。跟克必隆G载体一样,本产品带有自基因,SmaI位点位于该基因之中,只有当外源平末端DNA插入片段插入SmaI位点,连接后的DNA转化的细胞才能生长,所以最后得到的转化子几乎都是含有平末端DNA插入片段

打印当前页

分享到:

 

克必隆B载体(即用型平末端克隆载体)

名称

规格

价格

手册

克必隆B载体(即用型平末端克隆载体)

2ug

询价

 

本产品是在LMAI Bio克必隆G载体的基础上开发的专门用于高效快速克隆平末端DNA段的专用载体,它是由SmaI酶切克必隆G载体后经过纯化得到的即用型线性载体。跟克必隆G载体一样,本产品带有自基因,SmaI位点位于该基因之中,只有当外源平末端DNA插入片段插入SmaI位点,连接后的DNA转化的细胞才能生长,所以最后得到的转化子几乎都是含有平末端DNA插入片段的重组子。

1、 即用性,可以直接用于连接反应,免去繁琐的酶切,电泳检测,纯化,去磷酸化,再纯化等步骤。

2、 具有克必隆-G载体的所有优点,包括零背景,适用于所有E.coli菌株,多拷贝的colEI型复制起始位点。

3、 高效率,由于杀基因的使用有效地减除了载体自身环化对平末端DNA克隆的影响,自身环化得到的转化子在有选择液存在时只占总转化子的1%-5%。

4、 应用广泛,可用于克隆酶切产生的平末端DNA,Pfu酶扩增的PCR片段,cDNA段,3'-和5'-RACE片段,Taq酶扩增的PCR片段(部分为平末端)。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
相关产品列表:

人淋巴毒素β(LTB)ELISA Kit

人淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)ELISA Kit

人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit

人淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA Kit

人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA Kit

人淋巴细胞因子ELISA Kit

人磷酸甘油酸变位酶2(PGAM2)ELISA Kit

人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA Kit

人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA Kit

人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA Kit

人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA Kit

人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA Kit

人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA Kit

人磷酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA Kit

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

文章资讯

  • 新闻资讯
  • 技术文章
    • 联系我们

      邮箱:shlmai@163.com
    • 地址:上海市松江区新车公路185号上海莘莘学子创业园
    • 座机:86-021-67680335
    • 联系人:周经理

    上海联迈生物工程有限公司是国内专业的克必隆B载体(即用型平末端克隆载体)厂家,欢迎广大顾客来电咨询!

    Copyright © 2018 All Rights Reserved 网站地图 技术支持:环保在线  备案号:  管理登陆

    分享到:
    在线客服