13052188602
产品中心
首页 > 产品中心 > 分子生物学 > 克隆及表达产品 > 一站式TA克隆试剂盒(含感受态)

一站式TA克隆试剂盒(含感受态)

简要描述:

一站式TA克隆试剂盒(含感受态)AT克隆就是利用T载体两个3'端各带有一个T突出,而PCR扩增产物两个3'端各带有一个A突出的特点,在DNA连接酶的作用下,将PCR产物克隆到T载体中的过程,它是克隆PCR扩增产物的主要手段。本产品提供了完成AT克隆的所有成份,具有下列特点:
1. 一站式,用户只需要准备PCR产物即可进行AT克隆。

打印当前页

分享到:

 

一站式TA克隆试剂盒(含感受态)

名称

规格

价格

手册

一站式TA克隆试剂盒(含感受态)

20次

询价

 

AT克隆就是利用T载体两个3'端各带有一个T突出,而PCR扩增产物两个3'端各带有一个A突出的特点,在DNA连接酶的作用下,将PCR产物克隆到T载体中的过程,它是克隆PCR扩增产物的主要手段。本产品提供了完成AT克隆的所有成份,具有下列特点: 

1. 一站式,用户只需要准备一站式TA克隆试剂盒(含感受态)PCR产物即可进行AT克隆。

2. T载体由XcmI酶切方法制备,两个5'端100%含T突出,自连率几乎为零。

3. 克隆效率高,一次AT克隆实验一般能得到上百个重组子。

4. 阳性率高,一般能到90%以上,大大缩短了筛选工作。

5. 提供供两次实验用的对照插入片段,方便分析实验数据。

6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如BstZI、EcoRI、NotI),便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。

7. 克隆位点两侧分别有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。

8. 可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。

9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。

10. 含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,一站式TA克隆试剂盒(含感受态)离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
一站式TA克隆试剂盒(含感受态)相关产品列表:

人补体片段3b受体(C3bR)ELISA Kit

人补体片段3c(C3c)ELISA Kit

人补体片断3a(C3a)ELISA Kit

人补体片断3b(C3b)ELISA Kit

人补体片断4b(C4b)ELISA Kit

人补体片断5a(C5a)ELISA Kit

人补体片断5b(C5b)ELISA Kit

人补体因子D(CFD)ELISA Kit

人不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA Kit

人不耐热肠毒素B亚单位(LTB)ELISA Kit

人不透光相关蛋白(OPAs)ELISA Kit

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

上一个 : 多克隆抗体    下一个 :  一站式平末端克隆试剂盒

文章资讯

  • 新闻资讯
  • 技术文章
    • 联系我们

      邮箱:shlmai@163.com
    • 地址:上海市松江区新车公路185号上海莘莘学子创业园
    • 座机:86-021-67680335
    • 联系人:周经理

    上海联迈生物工程有限公司是国内专业的一站式TA克隆试剂盒(含感受态)厂家,欢迎广大顾客来电咨询!

    Copyright © 2018 All Rights Reserved 网站地图 技术支持:环保在线  备案号:  管理登陆

    分享到:
    在线客服