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自诱导培养基(lac启动子)

简要描述:

自诱导培养基(lac启动子)本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中碳源和能源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和期后的自动诱发。具有下列特点:
1. 不需添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2. 免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选 。

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自诱导培养基(lac启动子)

名称

规格

价格

手册

自诱导培养基(lac启动子)

200mL

690元

 

本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中碳源和能源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和期后的自动诱发。具有下列特点: 

1. 不需添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。

2. 免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选 。

3. 细菌生长密度远高于IPTG诱导表达系统 。

4. 外源蛋白表达量远远高于IPTG诱导表达系统。

5. 本产品即开即用,操作简单 。

6. 与各种细胞培养容器兼容(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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