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细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

简要描述:

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒本试剂盒是基于超速离心的快速提取细菌膜蛋白的试剂盒。其原理是裂解细胞后,通过超速离心分离出细胞膜和附着的蛋白质。跟传统的密度梯度离心法和去污剂法相比,本方法具有下列特点:
1. 一步式分离细胞膜和膜蛋白,密度梯度离心法简单快捷。
2. 膜蛋白纯度高,能够去除各种胞浆蛋白的污染,也能去除松散附着在细胞膜上的蛋白,所得膜蛋白主要是整合蛋白。
3. 膜蛋白完整性好,主要是由于试

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细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

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细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

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990元

 

本试剂盒是基于超速离心的快速提取细菌膜蛋白的试剂盒。其原理是裂解细胞后,通过超速离心分离出细胞膜和附着的蛋白质。跟传统的密度梯度离心法和去污剂法相比,本方法具有下列特点:

1. 一步式分离细胞膜和膜蛋白,密度梯度离心法简单快捷。

2. 膜蛋白纯度高,能够去除各种胞浆蛋白的污染,也能去除松散附着在细胞膜上的蛋白,所得膜蛋白主要是整合蛋白。

3. 膜蛋白完整性好,主要是由于试剂中含有抑制蛋白酶活性的成分。

4. 回收效率高,一般能得到相当于总蛋白量6%的膜蛋白。

5. 可用于E.coli,S.typhimurium,K.aerogens,P.aeruginosa,C. crescentus等细菌。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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