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SDS-PAGE 样品制备试剂盒

简要描述:

SDS-PAGE 样品制备试剂盒 本产品为SDS-PAGE电泳样品制备专用试剂盒,它具有下列特点:
1. 减少由于不兼容污染物造成的电泳假象,提供重复性好的SDS-PAGE结果。
2. 快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。

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SDS-PAGE 样品制备试剂盒

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SDS-PAGE 样品制备试剂盒

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 本产品为SDS-PAGE电泳样品制备专用试剂盒,它具有下列特点:

1. 减少由于不兼容污染物造成的电泳假象,提供重复性好的SDS-PAGE结果。

2. 快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。

3. 在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。

4. 无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫酸铵。

5. 对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。

6. 洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容,因此可以对处理过的样品进行定量。

7. 最少可以处理2微升样品。

RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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