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SDS-PAGE预制胶

简要描述:

SDS-PAGE预制胶SDS-PAGE电泳技术是广泛应用于生物学、临床与基础医学、环境监测和食品科学等实验室的一种蛋白及核酸的检测及鉴定方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。SDS-PAGE因具有较高的分辨率而广泛的应用于遗传学,分子生物学,细胞生物学,微生物学,植物学,动物学等各个学科领域中蛋白质分子量测定,并且以操作简便,重复性高,结果准确,

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SDS-PAGE预制胶

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SDS-PAGE电泳技术是广泛应用于生物学、临床与基础医学、环境监测和食品科学等实验室的一种蛋白及核酸的检测及鉴定方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。SDS-PAGE因具有较高的分辨率而广泛的应用于遗传学,分子生物学,细胞生物学,微生物学,植物学,动物学等各个学科领域中蛋白质分子量测定,并且以操作简便,重复性高,结果准确,易于分析等优点成为目前蛋白质及核酸检测与鉴定的一种主流实验技术。本公司预制胶产品具有下列特点:

1. 保质期长: 可以在低温条件下保存1年。 

2. 分辨率高: 通过对缓冲液的改良,减少了放置期间化学物质的降解,从而大大提高了凝胶的分辨率。

3. 电泳时间短 : 30-50分钟即可完成整个电泳过程。

4. 安全性高: 传统SDS-PAGE在配制过程中需要接触有毒有害物质,使用预制胶可降低操作人员与危险品接触的机率。

5. 价格实惠,每块不到50元,只有国外产品价格的一半。


RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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