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CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒

简要描述:

CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒本试剂盒是基于WST-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品,主要成分为水溶性四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8为一种MTT类似物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜 (formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。与第

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CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒

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CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒

5mL

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本试剂盒是基于WST-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品,主要成分为水溶性四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8为一种MTT类似物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜 (formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。与*代试剂盒相比,它具有下列特点:
1. 溶液稳定,对细胞无毒性,可直接同步加入到细胞样品中长时间孵育,可以多次测定选取测定时间。
2. 灵敏度高,操作简便、快捷,实验结果重复性好。
3. 水溶性,免去后续的溶解步骤。
4.   不需要换液,尤其适合于悬浮细胞。
5. 安全无毒,不会对操作人员身体造成危害。
6.  可以广泛应用于生物活性因子的活性检测、药物的筛选、细胞增殖检测、细胞毒性测定及肿瘤药敏等实验。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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